环指蛋白4（RNF4）是一种转录因子，在小鼠的睾丸中表达很高，可与雄激素受体互作。有研究者研究显示，RNF4蛋白作为一种转录协调子，在颗粒细胞、卵细胞及精细胞的发育过程中发挥着重要的调控作用。因此选择RNF4做为影响繁殖性状的候选基因。

1 材料与方法

1.1 材料

猪的耳组织统一放在-20℃保存备用。

1.2 方法

1.2.1 引物的设计与合成

根据RNF4 基因DNA序列设计引物，退火温度为59.1℃。

1.2.2 PCR扩增

PCR扩增后，可见937 bp的清晰目的条带。

1.2.3 限制性内切酶酶切（RFLP）

PCR产物经内切酶酶切后，观察其分型结果。

2 结果与分析

2.1 猪RNF4基因的多态位点检测

当多态位点为TC基因型时，可见3个片段（937 bp+545 bp+392 bp）；当多态位点为TT基因型时，可见一个片段（937 bp）（图1）。

猪RNF4基因SacII酶切分型结果

图1  猪RNF4基因SacII酶切分型结果