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检测非瘟死猪无需解剖,取腹股沟淋巴结即可代替

放大字体  缩小字体🕓2022-02-07  来源:🔗养猪职业经理人  💛3956
核心提示:对于病死猪检测ASFV样本,OIE推荐的是脾脏、淋巴结、肺脏、扁桃体和肾脏,然而获取这些样本需要对病死猪进行解剖,不仅费事,而

对于病死猪检测ASFV样本,OIE推荐的是脾脏、淋巴结、肺脏、扁桃体和肾脏,然而获取这些样本需要对病死猪进行解剖,不仅费事,而且容易污染环境,因此本文评估了腹股沟淋巴结作为检测样本的准确性,如此做,采样工作将在几分钟内完成,同时不会对环境造成污染。

评估结果表明,ASFV在腹股沟淋巴结与脾脏中的的病毒载量相近,同时对于感染ASFV强毒和中等毒力猪的具有极高的准确性和敏感性(100%)。因此,用腹股沟淋巴结检测ASFV是可行的,适用于商品场、母猪场以及屠宰场,或当猪场不明原因的出现大规模死亡时进行监测。

腹股沟淋巴结的采样方法如下:

实验过程

取4-5周龄的三元杂交猪,分别进行试验。

一、试验1的3头猪通过口鼻感染ASFv爱沙尼亚2014株,2ml病毒液每个鼻孔0.5ml,口服1ml,攻毒剂量为2×105 TCID50,攻毒后6天,试验组开始表现为高热和精神沉郁。

二、试验2的4-18号猪,通过口鼻感染ASFv爱沙尼亚2014株,攻毒剂量为2×105 TCID50,试验猪在攻毒后4天出现发热及精神沉郁等症状。在攻毒后7天,18号猪死亡。

三、试验3的19-20号猪,肌肉注射ASFV加纳20株(2017年基因1型),每头猪在后腿注射2ml,每条腿注射1ml,攻毒剂量为1×103TCID50。攻毒5天后,19-20号猪均出现高热,昏昏欲睡,病情发展快速,有便血出现。攻毒后7天对两头猪安乐死。

四、试验4的21-22号猪,口鼻攻毒ASFv尼日利亚 RV502株3ml,这是2020年从尼日利亚分离到的基因2型非瘟强毒株。每头猪攻毒2×105 TCID50,两头猪均在攻毒后4天出现高热,粪便颗粒干燥、发黑,精神沉郁,攻毒后5天两头猪均出现直肠出血,21号在攻毒后6天死亡,22号也在同一天执行安乐死。

五、试验5的23-25号猪,口鼻感染越南ASFV 2561株2.8ml,每头猪攻毒2×105 TCID50。

六、试验6的26-44号猪,肌肉注射ASFV格鲁吉亚2007株1ml,攻毒剂量为1×103TCID50。用于评估口腔液样本。

1、脾脏和腹股沟淋巴结中的ASFV病毒载量,发现所有ASFV毒株之间均成正相关。

2、中等毒力和强毒株的相关性,脾脏样本和腹股沟淋巴结的病毒载量仍然呈正相关,且差异极显著。

3、感染中等毒力的ASFV爱沙尼亚2014猪的样本,脾脏和腹股沟淋巴结的正相关程度最高。

将脾脏和腹股沟淋巴结ASFV平均病毒载量进行比较时,脾脏样本略高于腹股沟淋巴结,但是把所有样本放到一起分析时,两者之间统计学差异不显著。

其中a、d是所有毒株的脾脏和腹股沟淋巴结病毒载量的相关性,b、e是爱沙尼亚毒株的脾脏和腹股沟淋巴结病毒载量的相关性,c、f是强毒株的脾脏和腹股沟淋巴结病毒载量的相关性。

将中等毒力的ASFV爱沙尼亚2014株的病毒载量单独分析,样品间并没有统计学差异。在感染ASFV强毒株中,脾脏样品的病毒载量最高,差异具有统计学意义,但是脾脏与腹股沟淋巴结的ASFV载量的差异较小。

抛开所有,无论病毒载量高低和差异显著与否,在全血和脾脏样本中检测到ASFV的样本,在腹股沟淋巴结中的也同样能够检出,表明该方法可行。

 编辑:刘金娥

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