各省、自治区、直辖市动物疫病预防控制机构、新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站,各有关单位:
为做好我国猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)精准防控与技术指导,科学研判猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行态势,推进PRRS净化,中国动物疫病预防控制中心猪繁殖与呼吸综合征参考实验室于2025年10月起,在全国范围内开展2025-2026年冬春季PRRSV全基因组测序行动,面向养殖场户收集PRRS阳性样品,参考实验室根据病料CT值及病毒分离鉴定情况,开展100份阳性样品的全基因序列分析,并将检测结果反馈相应省份及养殖场户,用于指导PRRS防控与净化。现将有关事项通知如下。
一、行动目标
全国范围收集不少于300份PRRS阳性样品,完成其中100份样品全基因组测序,开展PRRSV流行趋势分析,形成并发布分析报告,建立并完善国家PRRS参考实验室PRRSV全基因组序列数据库,指导各地做好PRRS防控工作。
二、采样要求
PRRS阳性样品的收集需严格遵循无菌操作、适时采集、适量保存的原则,以确保病料中病毒含量充足、避免污染,为后续实验室检测(如测序、病毒分离)提供可靠材料。
(一)采样前准备
人员防护:采样人员需穿戴一次性防护服、手套、口罩,避免直接接触病料。
工具消毒:所有采样工具(如手术刀、剪子、镊子、注射器、离心管)需经高压蒸汽灭菌(121℃,20分钟)或干热灭菌(160℃,2小时)处理;一次性工具需确保无破损、无污染。
病料容器:使用无菌、密封的容器(如自封袋、离心管、病毒保存液管),标注样品信息(样品编号、采样日期、组织类型、发病背景)。
(二)采样时机选择
PRRSV感染的急性期(发病初期)是采样最佳时机,此时病料中病毒含量最高,检测阳性率最高。
组织样品:需在猪只死亡后6小时内采集,避免组织腐败导致病毒降解。
血清样品:采集前用酒精棉擦拭采血部位消毒,采集全血不少于10mL,分离血清量不少于5mL。
(三)采样数量及样品要求
发现疑似PRRSV感染的病猪(如临床发生母猪流产、死胎、呼吸困难等症状),采集同一发病群体3-5份病料(仅限肺脏、扁桃体、淋巴结、血清),经实验室荧光RT-PCR检测证实为PRRSV阳性后送样。为确保后续病毒分离和测序的成功率,建议送检CT值不高于25的样品。同一县区的同一养殖场户送样不超过5份。
(四)样本类型及采集方法
PRRSV可感染猪的多个组织器官,肺脏、扁桃体、淋巴结、血清是最常用的样本类型,具体采集方法如下:
1.组织样品
肺脏:取病变明显的肺组织如肺尖、肺门周围的间质性肺炎病灶,用无菌手术刀切取5-10g,放入无菌自封袋或离心管中。
淋巴结:取病变的肠系膜淋巴结或颈部淋巴结等,切取3-5g,单独包装。
扁桃体:用无菌镊子取出扁桃体,放入无菌袋中,单独包装。
2.血清样品
用无菌注射器抽取猪只前腔静脉血(10mL),倾斜放置或离心,待血清析出后装入血清分离管中。每份组织单独包装,避免交叉污染。
(五)样品保存与寄送
短期保存(24小时内送检):组织或血清样品放入4℃冰箱冷藏保存。
长期保存(超过24小时):组织样品:放入-20℃冰箱冷冻(可保存1-3个月);血清样品:放入-20℃冰箱保存(可保存6个月以上);避免反复冻融。
样品寄送:病料需放入保温箱(内加冰袋或干冰)并填写样品寄送单(见附件),确保全程冷链运输。样品可通过当地疫控机构寄送,或经当地疫控机构确认PRRS阳性后直接寄送中国动物疫病预防控制中心PRRS参考实验室。
(六)注意事项
PRRS阳性样品属于潜在传染源,其包装、运输及无害化处理均需严格遵守《病原微生物实验室生物安全管理条例》等相关规定,严防泄漏,确保生物安全。
三、条件保障
中国动物疫病预防控制中心PRRS参考实验室负责全部PRRS阳性样品全基因组测序与分析、数据分析与报告撰写、结果反馈与技术支撑,PRRSV全基因组数据库建设与维护。
各地各级疫控机构负责本次行动的组织与宣传引导,对拟寄送样品进行初核,确保样品信息准确、完整,保存运输条件符合要求。指导送样单位按要求填写《PRRS阳性样品采样单》,可为辖区内养殖场户提供样品集中寄送的便利或指导,确保样品通过安全、可靠的冷链途径及时送达参考实验室。
本次行动所需的阳性样品全基因组测序、数据分析及数据库建立等费用由PRRS参考实验室承担。各地疫控机构组织开展宣传动员、样品初筛及相关协调工作的经费由各单位自行保障。鼓励有条件的地方对积极参与行动的养殖场户给予适当激励与条件保障。
四、联系人及联系方式
样品寄送地址及联系人:北京市大兴区天贵大街17号中国动物疫病预防控制中心,李明阳:16692722969
PRRS参考实验室联系人及联系方式:
周智:010-59198918 ;王睿男:010-59198934。
中国动物疫病预防控制中心
(农业农村部屠宰技术中心)
2025年10月22日

